1. 무균시험법 배지에 관련된 주요 개정 내용​

1. 액상티오글리콜산배지 제조방법

필요하면 1mol/L 수산화나트륨시액을 넣어 멸균한 다음의 pH가 7.1 ± 0.2가 되도록 조정한다.
배지를 보존할 필요가 있을 때에는 미리 멸균된 기밀용기에 넣어서 멸균하여 2~25℃에서 보존한다.

2. 대두카제인소화배지 제조방법

필요하면 1mol/L 수산화나트륨시액을 넣어 멸균한 다음의 pH가 7.3 ± 0.2가 되도록 조정한다.

2. 무균시험법 중 배지성능시험 및 측정법 적합성 시험에 적절한 시험용 균주 개정 내용

전체 균주 리스트에 혐기성균을 제외하고 KCTC(생물자원센터) 균주가 추가

3. 무균시험법의 주요 개정 내용

* 검체의 무균시험 가) 수성액제

멤브레인필터당 100mL의 세정액으로 5회 이상 초과하여 세정하지 않는다. 멤브레인필터를 여과기로부터 꺼내어 반으로 절단하거나 미리 검액을 이등분하여, 꺼낸 전체 멤브레인필터를 각 배양액으로 옮기거나 무균적으로 이등분하여 각각에 대하여 동일한 여과 조작을 하여 얻은 2장의 멤브레인필터를 각각 각각을 2개의 배지에 넣는다. 또는 배지를 멤브레인필터가 장착된 여과기 안으로 넣는다. 각 배지의 양은 측정법의 적합성시험으로 확립된 양을 쓴다. 에서 사용한 양과 동일하게 사용한다. 또는 멤브레인필터를 장착한 여과기 내에 검액을 이등분해 여과한 다음 각각에 배지를 넣는다. 배지를 14일 이상 배양한다.

4. 미생물한도시험법 – 생균수 시험에 대한 주요 개정 사항

* 미생물한도시험법 中 I. 비무균제품의 미생물학적시험 : 생균수시험 - 4. 배지성능, 측정법의 적합성 및 음성대조 4.4 배지성능

신선한 새로 조제한 배양균을 써서 시험하는 경우에는 유효성이 확인된 이전 시험을 통해 확인된 배지 배치에서 이전에 얻은 증식과 동등한 증식이 인정되어야을 확인한다. 액체배지에서도 유효성이 확인된 배지 배치로 미리 시험하여 얻은 증식과 동등한 증식이 인정되어야 한다. 또한, 이전 시험을 통해 확인된 배치의 배지에서 얻은 증식과 동등한 증식을 확인한다.

신선한 배양균이 옛날 대한약전 미생물시험법 가이드라인에서 "표준화된 배양균"은 정량균주, "신선한 배양균"은 정성균주라는 글이 있었는데 이 내용이 "새로 조제한 배양균"으로 바뀌어버리니 헷갈리네요!

정량균주를 구매하여 사용하는 경우에는 배지 및 균주의 Lot 번호가 달라지는 경우에 적용하면 될 것 같습니다.

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* 미생물한도시험법 中 I. 비무균제품의 미생물학적시험 : 생균수시험 - 4. 배지성능, 측정법의 적합성 및 음성대조 4.5.3 중화제

항균제의 활성을 중화하기 위해 중화제를 쓸 수 있다(표 I-2). 중화제는 선정한 희석액 또는 배지에 멸균 전에 미리 첨가할 수 있다. 가능한 멸균 전에 첨가한다.

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5. 미생물한도시험법 – 특정미생물시험에 대한 주요 개정 사항

* 미생물한도시험법 中 II. 비무균제품의 미생물학적시험 : 특정미생물시험 - 4. 제품의 시험 4.2 대장균 ③ 판정

집락의 증식이 인정(맥콘키한천배지에서 유당분해균은 적색에서 거의 적색, 비분해균은 흰색)될 때에는은 대장균의 존재 가능성을 나타낸다. 이때는 양성으로 의심하고 동정시험으로 확인한다.

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모든 특정미생물시험에서 의심집락의 성상 표현을 없애고 어떠한 균이라도 증식된다면, 각 미생물의 존재 가능성을 나타내기 때문에 무조건 동정시험을 진행하라고 변경되었습니다!

6. III. 비무균 의약품의 미생물학적 품질 특성 (신설)

비무균제제에서 어떤 특정미생물의 존재는 제품의 약효에 대한 활성을 감소시키거나 심지어 비활성화로 이어질 가능성이 있다. 또한 환자의 건강에 악영향을 미칠 가능성도 있다. 따라서 의약품 제조업자는 제품의 제조, 저장 및 유통 시 최신 가이드라인에 따라 의약품 제조 및 품질관리를 실시함으로써 최종제품의 낮은 생물학적 위해를 보장해야 한다. 비무균제제의 미생물시험은 이 장에서의 미생물한도시험 『생균수시험』, 『특정미생물시험』을 따른다.

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비무균제품의 총호기성미생물수(TAMC) 및 총진균수(TYMC) 허용기준은 표III-1에 나타나 있다. 미생물 허용기준은 각각의 시험결과 또는 반복측정을 할 경우에는 반복 측정값으로 한다. 미생물학적 품질허용기준이 규정되어 있을 때 아래와 같이 판정한다.

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표III-1에서는 미생물 허용기준을 설정한 제제에서 존재해서는 안 되는 특정미생물도 제시한다. 다만, 검출되어서는 안 되는 특정미생물을 모두 기술한 것은 아니므로, 어떤 특정 제제에서의 출발물질의 특성이나 제조공정에 따라 다른 미생물에 대한 시험도 필요하다.

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규정된 시험법이 규정된 수준의 미생물을 효과적으로 측정할 수 없다고 입증된 경우는, 제시된 허용기준에 최대한 가까운 검출한계를 가진 검증된 시험방법을 사용할 수 있다.

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표III-1에 기재한 미생물 외에도 회수된 다른 미생물의 중요성은 다음과 같이 평가한다.

·         제품의 용도 : 위험요소는 투여경로(눈, 코, 호흡기)에 따라 다르다.

·         제품의 특성 : 해당 제품은 미생물의 증식을 돕는가, 아니면 충분한 항균 활성을 가지는가

·         적용법 :

·         사용자 : 신생아, 유아, 쇠약한 사람에 따라 위험도가 다르다.

·         면역반응 억제제 : 코르티코스테로이드 사용

·         질병, 외상, 장기 손상의 유무

관련 요소에 대한 위험평가는 미생물학 및 미생물학적 데이터 해석에 있어서 특별히 훈련된 직원이 수행한다. 원료에 대한 위험평가는 그 원료가 제품에 쓰이는 공정, 최신 시험기술, 원하는 품질을 가진 원료의 입수 가능성을 고려한다.

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